Микроскоп биологический исследовательский МБИ-15
Универсальный исследовательский биологический микроскоп МБИ-15 предназначается для визуального наблюдения и фотографирования объектов в проходящем и падающем свете.
При освещении объектов проходящим светом исследования па микроскопе могут проводиться в светлом (прямое и косое освещение) и темном поле, методом фазового контраста, в поляризованном свете.
При работе в падающем свете исследования могут проводиться в светлом и темном поле, при смешанном освещении объекта, а также в свете видимой люминесценции объектов, воз¬буждаемой ультрафиолетовыми и синефиолетовыми лучами в диапазоне длин волн от 360 до 440 нм. Кроме того, при исследо¬вании может быть применено освещение объекта сверху светом, возбуждающим люминесценцию, и одновременное освещение его снизу по методу темного поля или фазового контраста.
Для фотографирования исследуемых объектов в микроскоп встроен фотозатвор, работающий от руки (при фотографирова¬нии на пластинку) и от экспонометрического устройства (при фотографировании на пленку и пластинку). Фотографирование на микроскопе может осуществляться пленочной фотокамерой с размерами кадра 24x36 мм или пластиночной камерой с размерами снимка 9Х 12см.
Микроскоп может применяться для исследований в области биологии, ботаники, зоологии, а также в других областях науки и техники.
Микроскоп МБИ-15 выпускается в четырех вариантах комплектации:
I — МБИ-15—полный комплект прибора;
II — МБИ-15-1 — без принадлежностей, обеспечивающих наблюдение объекта в свете видимой люминесценции;
III — МБИ-15-2 —без импульсного источника света;
IV — МБИ-15-3 — без принадлежностей, обеспечивающих наблюдение объекта в свете видимой люминесценции, без импульсного источника света, с комплектом серийных апохроматических объективов.
Различные варианты комплектации обеспечивают потребителю возможность выбора микроскопа в зависимости от специфики его работы. Виды работ, которые можно производить на микроскопах серии МБИ-15, указаны в табл. 1.
1. Наблюдение изображения объекта в проходящем свете в светлом поле при прямом и косом освещении
2. Изучение объектов по методу темного поля
3. Изучение объектов по методу фазового контраста
4. Изучение объектов в поляризованном свете
5. Изучение объектов в падающем свете
6. Изучение объектов при смешанном освещении
7. Наблюдение изображения объекта в свете люминесценции:
7.1. При освещении возбуждающим светом сверху, через опак-иллюминатор и объектив, по методу светлого и темного поля
7.2. При освещении возбуждающим светом снизу, через конденсор
8. Фотографирование изображения объекта на пленку (размер кадра 24X36 мм) и на пластинку (размер снимка 9X12 см):
8.1 с использованием осветителя, имеющего в качестве источника света лампу накаливания ОП12-100
8.2 с использованием осветителя, имеющего в качестве источника света ртутную лампу ДРШ250-3
8.2 с использованием осветилеля, имеющего в качестве источника света импульсную лампу
Микроскоп МБИ-15 предназначается для эксплуатации в макроклиматических районах с умеренным и холодным климатом в помещениях с кондиционированным или частично кондиционированным воздухом при температуре воздуха от +10 до + 25° С.
В помещении, где устанавливается микроскоп, не должно быть пыли, паров кислот и щелочей, а также станков или других установок, вызывающих вибрации.
Работа с иммерсионными объективами должна производиться в помещении с температурой воздуха от +10 до +25°С.
Прибор не должен эксплуатироваться в жилых домах или помещениях, подключаемых к электрическим сетям жилых домов.
Рабочее расстоя-ние, мм
Поле с окуляром 10х в плоск-ости объекта, мм
М-7П 7хП М-10П 10ХП
Телеобъектив и конденсор КОН-3
ОПА-1 * ОПА-2* ОПА-3 * ОПА-4 * ОПА-5*
10X0,30 16X0,40 40X0,65 60X0,85 100X1,25
Сухая Масляная иммерсия
АМ-13П К7хП АМ-14Ф ФК10*
Телеобъектив и конденсор ОИ-13
10X0,30 20X0,65 40X0,95
Масляная иммерсия Масляная иммерсия
Примечания: 1. Объективы рассчитаны на длину тубуса 160 мм и толщину покровного стекла 0,17 мм.
Поле объективов, отмеченных звездочкой, указано с окуляром К-6,3*.
Иммерсионный объектив 100X1,25 (масляная иммерсия) во избежание вывода из строя промывать только петролейным эфиром или чистым бензином.
Примечания: 1. Объективы рассчитаны на длину тубуса 160 мм и толщину покровного стекла 0,17 мм. Объектив 70X1,23Ф имеет коррекцнонную оправу для поправки при отклонении толщины покровного стекла от 0,17 мм.
На корпусе объективов 40x0,65 и 90X1,25 награвированы буквы «Ф» или «ФЛ».
На корпусе объективов 20X0,40 и 70X1,23 награвирована буква «Ф».
При использовании объективов масляной иммерсии для исследования объектов в свете люминесценции необходимо применять специальное нсфлюоресцирующсе иммерсионное масло из комплекта микроскопа.
Объективы 40X0,65ФЛ и 90Х1.25ФЛ, предназначенные для работы по методу фазового контраста, могут быть нспользованы для наблюдения люминесценции при смешанном освещении.
Рабочее расстояни, мм
Поле с окуляром 10х в плоскости объекта, мм
объектив и конденсор КОН-3
Примечания: 1. Объективы рассчитаны на длину тубуса 160 мм и толщину покровного стекла 0,17 мм.
Объектив 70X1,23 имеет коррекционную оправу для поправки при отклонении толщины покровного стекла от 0,17 мм.
На корпусе объективов награвирована буква «Л».
Поле объективов 10x0,40 и 30x0,90 дано с окуляром 4х.
Увеличение и апертура
Поле с окуляром 10х в плоскости объекта, мм
Примечания: 1. Объективы рассчитаны на длину тубуса 190 мм и на объекты без покровного стекла.
2. При применении иммерсионных объективов для исследования объектов в свете люминесценции необходимо использовать нефлюоресцирующее иммерсионное масло из комплекта микроскопа.
3. На корпусе объективов 21X0,40 и 40X0,65 награвирована буква «Л»; объективы применяются для исследования объектов в свете люминесценции.
Фокусное расстояние, мм
Линейное поле, мм
Для визуального наблюдения
2. ТЕХНИЧЕСКИЕ ДАННЫЕ
Собственное увеличение бинокулярной насадки 1,0; 1,6; 2,5
Увеличение ахроматической линзы 1,2
Спектральный диапазон возбуждения люминесценции, нм от 360 до 440
Спектральный диапазон исследуемой люминесценции, нм от 440 до 700
Характеристики объективов для работы в проходящем свете указаны в табл. 2.
Характеристики объективов для исследования методом фазового контраста указаны в табл. 3.
Характеристики объективов для исследования в свете люминесценции указаны в табл. 4. Характеристики объективов для работы в отраженном свете указаны в табл. 5. Характеристики окуляров указаны в табл. 6.
пределы поворота от 0 до 180°
пределы перемещения в вертикальном направлении, мм, не менее . от 0 до 30
цена деления нониусов для отсчета перемещения препарата в горизонтальной плоскости в продольном и поперечном направлениях, мм 0.1
цена деления шкалы барабана микро метрического механизма, мм 0.002
конденсора темного поля ОИ-13 1,2
панкратического конденсора ПК-3 от 0,16 до1,4
конденсора КОН-3 1,2
Источник света —лампа ОП12-100 (12 В, 100 В-А), ртутно- кварцевая лампа ДРШ 250-3 и импульсная лампа ИСК-25.
Питание ламн ДРШ250-3 и ИСК-25 осуществляется через соответствующие блоки питания, лампы ОП12-100 - через унифицированный источник питания «Гранат» от сети переменного тока напряжением (220±22) В, частотой 50 Гц.
Наибольшая потребляемая мощность. В-А 350
Габаритные размеры, мм, не более:
блока питания лампы ДРШ250-3 . . . 160X480X360
унифицированного источника питания «Гранат» 320X160X150
пульта управления фотосъемкой . . . 370x300x160
блока питания импульсной лампы . . 405x265x180
Масса, кг, не более: микроскопа 170
блока питания лампы ДРШ250-3 25
унифицированного источника питания «Гранат» 5
пульта управления фотосъемкой 12
блока питания импульсной лампы 16
3. СОСТАВ МИКРОСКОПА
В состав каждого микроскопа входят наборы объективов, окуляров, фотоокуляров и принадлежностей. Полный комплект микроскопа указан в его паспорте.
4. УСТРОЙСТВО И РАБОТА МИКРОСКОПА
4.1. Осветительная часть микроскопа
Осветительная часть микроскопа рассчитана по принципу нормального освещения. Эта часть обеспечивает работу в проходящем и отраженном свете, а также при смешанном освещении и в свете видимой люминесценции объектов.
При исследовании объектов в проходящем свете источником света является лампа накаливания ОП12-ЮО. В этом случае источник света 1 (рис. 1) коллектором 2, линзами 3, 4, 5 и призмой 6 проецируется в плоскость ирисовой апертурной диафрагмы 7. При этом осветительная линза 3 и линза 4 проецируют изображение оправы коллектора 2 в плоскость ирисовой полевой диафрагмы 8, изображение которой проецируется пан- кратическим конденсором 9 в плоскость объекта.
Вместо панкратического конденсора в систему могут быть установлены конденсор 10 темного поля (ОН-13) или конденсор 11 (КОН-3). При смене конденсора апертурная диафрагма 7 вместе с линзой 5 снимаются и на их место устанавливается телеобъектив 12. После установки телеобъектива источник света 1 проецируется коллектором 2, линзами 3 и 4, призмой 6 и телеобъективом 12 в плоскость ирисовой апертурной диафрагмы конденсора и далее линзами конденсора — в плоскость выходного зрачка объектива. При этом изображение полевой диафрагмы 8 проецируется телеобъективом и линзами конденсора в плоскость объекта 13.
В осветительную систему могут быть введены светофильтры 14.
Оптическая система микроскопа рассчитана на объективы для длины тубуса 190 мм, поэтому для сохранения коррекции системы при применении объективов, расчитанных на длину тубуса 160 мм, введена ахроматическая линза 15, повышающая общее увеличение системы в 1,2 раза.
При исследовании объектов в отраженном свете в светлом поле в ход лучей включаются зеркало 16 и отражатель 17 («СП»). В этом случае источник света 1 проецируется коллектором 2, зеркалом 16 и линзой 18 в плоскость ирисовой апертурной диафрагмы 19, изображение которой зеркалом 20, бифокальной линзой 21 и отражателем 17 проецируется в плоскость выходного зрачка эпиобъектива 22. Изображение ирисовой полевой диафрагмы 23 проецируется бифокальной линзой 21, отражателем 17 и эпиобъективом 22 в плоскость объекта 13.
Для работы в темном поле в ход лучей включаются кольцевая диафрагма 24 и зеркало 25 и полностью открываются апертурная диафрагма 19 и полевая диафрагма 23. В этом случае лучи от источника света проходят через бифокальную линзу 21 широким пучком. Затем центральная часть пучка срезается кольцевой диафрагмой 24, а краевые лучи пучка направляются кольцевым зеркалом 25 («ТП»), включаемым вместо отражателя 17, в зеркальный конденсор эпиобъектива 22 и далее—на объект. Апертура объектива и зеркального конденсора рассчитана так, что в объектив могут попасть только те лучи, которые отражаются или рассеиваются от структуры объекта, чем и достигается светлое изображение объекта на темном фоне поля микроскопа.
При исследовании полупрозрачных и непрозрачных объектов (например, мелких насекомых, зерен кристаллов и др.) при небольших увеличениях применяется смешанное освещение, т. е. одновременное освещение объекта снизу, через конденсор, и сверху, через объектив. В этом случае разделение светового пучка осуществляется с помощью светоделительной пластинки 26.
При исследовании объектов в свете люминесценции в качестве источника света применяется ртутная лампа ДРШ250-3, интенсивно излучающая свет в сине-фиолетовой и в ближней ультрафиолетовой областях спектра.
Для выделения определенных участков спектра из общего излучения источника света в комплекте микроскопа имеется набор светофильтров в оправах.
Светофильтры ФС1-2 (цифра после дефиса обозначает толщину светофильтра), ФС1-4 и СС15-2 применяются для возбуждения люминесценции объектов сине- фиолетовыми лучами с максимумом пропускания Х = 400нм. Кривые пропускания этих светофильтров показаны на рис. 2.
Светофильтры УФС6-3 и УФС6-5 применяются для возбуждения люминесценции объектов ультрафиолетовыми лучами с максимумом пропускания лямбда лямбда=365нм. Кривые пропускания этих светофильтров показаны на рис. 3.
При возбуждении люминесценции ультрафиолетовыми лучами с помощью светофильтров УФС6 в образовании изображения может участвовать весь видимый свет, в то время как при возбуждении люминесценции сине-фиолетовым светом (лямбда= 400-440 нм) в изображении можно наблюдать только зеленоватые, желтые и красные цвета.
Светофильтры УФС6 рекомендуется применять в основном при изучении первичной люминесценции объектов, а также в том случае, когда в изображении объектов требуется получить большое разнообразие цветов.
При изучении вторичной люминесценции флюорохромированных препаратов для возбуждения люминесценции достаточно использовать светофильтры, пропускающие сине-фиолетовую область спектра.
Все светофильтры, предназначенные для возбуждения люминесценции объектов, пропускают красные и инфракрасные лучи, поэтому рекомендуется совместно с ними применять светофильтр СЗС24-4 или СЗС7-2. Кривые пропускания светофильтров СЗС24-4 и СЗС7-2 показаны на рис. 4.
Длительное облучение объектов ультрафиолетовым светом приводит к их выцветанию, особенно если они флюорохромированы. Для защиты объекта рекомендуется в промежутках между исследованиями устанавливать в осветительную систему микроскопа светофильтр БС8-2, который прозрачен для видимой области спектра и срезает ультрафиолетовую его часть.
Непосредственно после коллектора располагается теплопоглотительная кювета 27 (см. рис. 1), предохраняющая светофильтры от нагревания.
Для ослабления светового потока при визуальном наблюдении применяются нейтральный светофильтр НС 10 и светофильтр МС13-2.
Лучи, возбуждающие люминесценцию объекта, после того как они прошли препарат и вызвали его свечение, необходимо убрать с помощью «запирающего» светофильтра.
«Запирающие» светофильтры - сменные и используются в определенном сочетании со светофильтрами возбуждения. Светофильтр, склеенный из стекол ЖСЗ и БС8, используется при работе со светофильтрами УФС6. Светофильтр, склеенный из стекол ЖС18 и ЖЗС19, используется при работе со светофильтрами возбуждения из стекол ФС1 или СС15.
Кривые пропускания светофильтров ЖСЗ, БС8, ЖС18 показаны на рис. 5.
При исследовании возбуждение люминесценции объекта может осуществляться при освещении объекта сверху, через опак- иллюминатор и объектив, и снизу, через конденсор. Кроме того, при наблюдении люминесценции может быть применено смешанное освещение объекта, когда возбуждение люминесценции осуществляется верхним светом при одновременном освещении объекта снизу, по методу темного поля или фазового контраста.
При освещении объекта снизу, через конденсор, источник света 28 (см. рис. 1) коллектором 29, линзами 3, 4 и призмой 6 проецируется в плоскость ирисовой апертурной диафрагмы конденсора 11 (КОН-3) и далее линзами конденсора — в выходной зрачок объектива 30.
Изображение полевой диафрагмы 8 линзой 4, призмой 6, телеобъективом 12 и конденсором 11 проецируется в плоскость объекта.
Светофильтры 31, применяемые для возбуждения люминесценции, размещаются между телеобъективом и конденсором. «Запирающий» светофильтр 32 установлен перед бинокулярной насадкой. В этом случае для сохранения коррекции системы в ход лучей вводится ахроматическая линза 15.
Для освещения объекта сверху, через объектив, при работе в светлом поле в ход лучей вводятся зеркало 16 и светоделительная пластинка 33 со специальным покрытием, отражающим лучи в пределах длин волн от 360 до 400 нм и пропускающим лучи в пределах длин волн от 440 до 700нм. В этом случае источник света 28 проецируется коллектором 29, зеркалом 16 и осветительной линзой 18 в плоскость апертурной диафрагмы 19, изображение которой зеркалом 20, бифокальной линзой 21 и светоделительной пластинкой 33 проецируется в выходной зрачок эпиобъектива 22. Изображение полевой диафрагмы 23 бифокальной линзой 21, светоделительной пластинкой 33 и эпиобъективом 22 проецируется в плоскость объекта.
Свет люминесценции объекта проходит в визуальную насадку через эпиобъек- тив 22 и светоделительную пластинку 33. Светофильтры 31, служащие для возбуждения люминесценции, устанавливаются в этом случае перед осветительной линзой 18.
Для освещения объекта сверху, через объектив, при работе в темном поле вместо светоделительной пластинки 33 включаются кольцевое зеркало 25 и кольцевая диафрагма 24, перекрывающая центральную часть пучка. В этом случае лучи от источника света 28, пройдя широким пучком через периферийную зону бифокальной линзы 21, попадают на кольцевое зеркало 25, которое направляет свет в зеркальный параболический конденсор эпиобъектива 22, концентрирующий свет на объекте.
При исследовании в свете люминесценции объектов по методу темного поля с применением эпиобъектива ненамного снижается освещенность объекта, но повышается контрастность изображения.
Смешанное освещение объекта, т. е. сочетание освещения верхним светом, возбуждающим люминесценцию, с нижним све¬том, по методу темного поля или фазового контраста достигается за счет разделения светового пучка, идущего от коллектора, с помощью светоделительной пластинки 26 с интерференционным покрытием.
4.2. Наблюдательная и фотографическая части схемы
Объективом микроскопа при любом виде освещения создается увеличенное изображение объекта, которое проецируется в плоскость полевой диафрагмы окуляров, установленных в биноку¬лярную насадку.
От объекта, освещенного проходящим или отраженным светом, лучи, пройдя объектив и ахроматическую линзу 15, включаемую при работе с объективом, рассчитанным на длину тубуса 160 мм, падают па призму 34 или светоделительную призму 35.
При включенной призме 34 лучи направляются в визуальный тубус и проецируют изображение объекта в плоскость полевой диафрагмы окуляров 36 бинокулярной насадки 37. При включенной призме 35 часть лучей (около 80%) направляется призмой 38 и коллектором 39 в фокальную плоскость сменного фотоокуляра 40, в которую в этом случае проецируется изображение объекта. С помощью фотоокуляра 40 изображение объекта проецируется или непосредственно на фотопленку 41, или через зеркало 42 — на фотопластинку 43. При этом меньшая часть света попадает в визуальный тубус, чем н обеспечивается одновременное наблюдение за объектом во время фотографирования.
За фотоокуляром 40 расположена призма-куб 44 со светоделительным покрытием, направляющая небольшую часть света (около 10—15%) на линзу 45 и далее через светофильтр 46 в плоскость фотокатода фотоэлектронного умножителя 47.
Между призмой-кубом 44 и фотопленкой 41 расположен фотозатвор 48.
При фотографировании с импульсным источником света 49 (лампа ИСК-25) в ход лучей дополнительно включаются свето- делительная пластинка 50 и коллектор 51. В этом случае часть лучей от источника света 1 (лампа ОП12-100) или от источника света 28 (лампа ДРШ250-3) в зависимости от вида освещения и метода микроскопировапия попадает в систему и непрерывно освещает объект.
Изменение окулярного увеличения одновременно в наблюдательной и фотографической частях микроскопа осуществляется включением одной или систем линз 52 бинокулярной насадки.
Контроль за правильностью настройки освещения при всех методах микроскопировапия, особенно при настройке освещения
для работы по методу фазового контраста, осуществляется визуальным наблюдением при включенной дополнительной системе
бинокулярной насадки, имеющей гравировку «ФК».
4.3. Электрическая схема
Электрическая часть микроскопа предназначена для автоматической отработки времени экспозиции при фотографировании и для обеспечения постоянного или импульсного освещения объекта.
Электрическая схема пульта управления фотосъемкой обеспечивает автоматическую отработку времени экспозиции при фотографировании наблюдаемого под микроскопом объекта на черно-белую фотопленку со светочувствительностью от 1 до 180 ед. ГОСТ с последующей перемоткой пленки на 1 кадр и па фотопластинку со светочувствительностью от 4,5 до 180 сд. ГОСТ, причем для пленок с высокой светочувствительностью обеспечиваются минимальные выдержки от 1/25 с, для пленок с низкой светочувствительностью — максимальные выдержки до 15 минут.
Принцип действия пульта управления фотосъемкой состоит в следующем. Часть светового потока, проходящего через объект, попадает на фотокатод фотоэлектронного умножителя ФЭУ-31. На выходе умножителя ток пропорционален световому потоку, падающему на фотокатод. Световой поток зависит от интенсивности освещения объекта и его оптической плотности.
В зависимости от светочувствительности применяемого фотоматериала электрическая схема отрабатывает время экспониро-
вания, которое равно времени изменения заряда конденсатора до определенного значения напряжения.
После того как напряжение на зарядном конденсаторе достигает определенного значения, отключается питание фотозатвора
и он закрывается. Затем на время порядка 0,4 секунды подается питание на электродвигатель перемотки пленки. Электродвига-
тель остановится после того, как кулачок, установленный в фотокамере и соединенный с мерным валиком, повернется па 1 обо-
рот и разомкнет цепь питания электродвигателя, и микроскоп готов к фотографированию следующего кадра.
В пульте управления фотосъемкой имеется цепь блокировки фотоэлектронного умножителя от излишне больших световых
потоков. Если освещенность фотокатода фотоэлектронного умножителя превышает допускаемую величину, то отключается пита-
ние фотоэлектронного умножителя и в этом состоянии схема не работает. Для возвращения схемы в исходное состояние не-
обходимо уменьшить освещенность объекта. В микроскопе предусмотрена работа с тремя источниками света: лампой накаливания ОП12-100, ртутной лампой ДРШ250-3 и импульсной лампой ИСК-25
Питание лампы ОП12-100 осуществляется через унифицированный источник питания «Гранат», а питание ламп ДРШ250-3
и ИСК-25 —через соответствующие блоки питания.В блоке питания лампы ИСК-25 напряжение на рабочих кон-
денсаторах регулируется трехпозиционным переключателем, что позволяет изменять энергию вспышки лампы. В момент вспыш-
ки лампы срабатывает фотозатвор микроскопа.
4.4. Конструкция
Прибор состоит из микроскопа 53 (рис.6), рабочего стола 54 с амортизатором 55 и двумя тумбами 56, блока 57 питания импульсной лампы, пульта 58 управления фотосъемкой, блока 59 питания лампы ДРШ250-3 и унифицированного источника
питания «Гранат» 60, которые могут быть установлены в любое место в пределах длины провода. В тумбах стола размещен комплект микроскопа.
На правой тумбе с задней стороны на направляющих крепятся фонарь 61 (рис. 7) с ртутной лампой и теплопоглотительная кювета 62 с защитной втулкой 63 (рис. 13).
Основными узлами микроскопа являются основание 64 (рис. 8), тубусодержатель 65 с револьвером 66 для объективов и механизмом 67 фокусировки микроскопа, предметный столик 68, механизм фокусировки конденсоров на кронштейне 69, бинокулярная насадка 70 с диском 71 перемены увеличения, фотокамера 72, осветитель 73 (см. рис. 7) с лампой ОП 12-100.
В основании микроскопа вмонтированы узлы, необходимые для освещения объекта при работе в проходящем свете.
Патрон с лампой ОП12-100 крепится в корпусе осветителя 73 с помощью винта 74. Для центрирования нити лампы относительно оптической оси микроскопа служат винты 75. С помощью рукоятки 76 осуществляется перемещение коллектора при фокусировке нити лампы в плоскость апертурной диафрагмы. Винт 77 (см. рис. 8) служит для закрепления осветителя на основании микроскопа.
При замене осветителя 73 (см. рис. 7) осветителем 61 с ртутной лампой отпускается винт 77 (см. рне.8), освобождается конический хвостовик осветителя из гнезда, снимается осветитель 73 (см. рис. 7), на его место устанавливается теплопогло- тительная кювета 62 с дистиллированной водой или 4-процентным раствором медного купороса. На направляющие кронштейна устанавливается до упора осветитель с ртутной лампой, который фиксируется в этом положении тормозным устройством. Между
кюветой и оправой коллектора должна быть помещена защитная втулка 63.
Рукоятка 78( см. рис. 8) служит для переключения зеркала 16( см. рис. 1), рукоятка 79 ( см. рис. 8)- для переключения светоделительной пластины 50 ( см. рис. 1). Такая же рукоятка с левой стороны служит для включения светоделительной пластины при смешанном освещение.
Конструктивно эти узлы выполнены так, что при вдвинутых в основание до упора рукоятках будет осуществляться освещение объекта снизу. При выдвинутой из основания до отказа одной из рукояток будет осуществляться или освещение объекта сверху, или смешанное освещение объекта, или же включение в ход лучей импульсной лампы. Над каждой из рукояток имеется планка с обозначением вида освещения и указателем положения включения.
В головке микроскопа установлен блок с отражателями. Включение отражателей осуществляется рукояткой 80 (см. рис. 8). Положения отражателей, соответствующие методам исследования, указаны на передней части корпуса головки.
Полевая диафрагма 8 (см. рис. 1), вмонтированная в основание, открывается поворотом рукоятки 81 (см. рис. 8). Винты 82 служат для приведения изображения полевой диафрагмы в центр поля микроскопа. С помощью винта 83 закрепляется узел апертурной диафрагмы 84 или телеобъектив, или же крышка после снятия указанных узлов.
Тубусодержатель 65 жестко соединен с основанием микроскопа. На тубусодержателе укреплены механизм грубой фокусировки рукоятка 85, механизм точной фокусировки рукоятка 86 и головка 87 с револьвером для объективов и гнездом для установки визуальных насадок.
Рукоятки грубой и точной фокусировки микроскопа расположены на одной оси. На рукоятке 86 точной фокусировки имеется шкала для отсчета величины перемещения объекта в вертикальном направлении в пределах от 0 до 2,2 мм.
Гнездо 88 служит для установки светофильтров возбуждения при работе с ртутной лампой в отраженном свете.
В револьвер могут быть ввернуты как эпиобъективы, так и обычные объективы, имеющие стандартную резьбу. Обычные объективы из комплекта микроскопа устанавливаются в револьвер с помощью специальных переходных втулок 89 (рис. 9).
При необходимости работы с объективами, не входящими в комплект микроскопа, можно воспользоваться свободными переходными втулками, входящими в комплект данного микроскопа. В этом случае необходимо подобрать для каждого объектива гнездо в револьвере, обеспечивающее минимальную расцентрировку системы. Номер гнезда следует запомнить и впоследствии только в него устанавливать соответствующий объектив.
Рукоятку 90 (см. рис. 8) служит для изменения диаметра полевой диафрагмы при работе в отраженном свете. Центрировка этой диафрагмы осуществляется винтами 91.
Бинокулярная насадка устанавливается в гнездо головки 87 и фиксируется шпонкой 92, после чего окончательно закрепляется винтом 93 (см. рис. 9).
Конструкция бинокулярной насадки позволяет изменять увеличение системы микроскопа как сменой окуляров, так и переключением собственных увеличений насадки. Для включения любой из систем перемены увеличения насадки служит диск 71 (см. рис. 8), на боковой поверхности которого имеются цифры «1.0», «1,6» и «2,5», обозначающие включенное увеличение насадки. Кроме того, в бинокулярной насадке имеется система, которая включается при настройке освещения и для работы по методу фазового контраста. Для включения этой системы диск 71 устанавливается в положение ФК. Вращением рукоятки 94 осуществляется фокусировка системы.
Бинокулярная насадка снабжена раздвижными окулярными трубками 95, позволяющими устанавливать окуляры по базе глаз наблюдателя. С помощью рукоятки 96 переключается система призм насадки, обеспечивающая либо визуальное наблюдение (рукоятка выдвинута), либо фотографирование при одновременном визуальном наблюдении (рукоятка вдвинута).
Фотоэлектронный умножитель крепится в кожухе 97. Внутри тубусодержателя расположена заслонка фото электронного умножителя, снабженная рукояткой 98. Заслонка предохраняет фотоэлектронный умножитель от засветки, поэтому она должна быть закрыта при всех методах микрокопирования (рукоятка 98 вдвинута). Но при фотографировании в момент экспонирования заслонка должна быть открыта, для чего рукоятка 98 выдвигается из корпуса до отказа.
Рукоятка 99 (см. рис. 9) предназначена для изменения диаметра апертурной диафрагмы при работе в падающем свете, рукоятка 100 — для включения светофильтра НС 10 перед фотоэлектронным умножителем при работе с пленками низкой светочувствительности.
Включение в ход лучей ахроматической линзы 15 (см. рис. 1),смонтированной на салазках, осуществляется с помощью рукоятки 101 (см. рис. 9).
Смена «запирающих» светофильтров и выключение их производятся поворотом диска 102, который может устанавливаться в три положения: положение 1 — включается светофильтр ЖСЗ; положение 2 — светофильтры ЖС18; ЖЗС19; положение 3 — светофильтры выведены из хода лучей.
При работе с ртутной лампой в проходящем свете светофильтры, возбуждающие люминесценцию объекта, устанавливаются на телеобъектив в оправе 103, помещаемый на место узла апертурной диафрагмы 84 (см. рис. 8).
В комплект микроскопа входит пластиночная камера 104 (см. рис. 9), устанавливаемая вместо пленочной камеры;
Предметный столик (рис.10) обеспечивает перемещение объекта в двух взаимно перпендикулярных направлениях, осущест
5. МАРКИРОВАНИЕ
Маркирование микроскопов производится в соответствии с чертежами.
На каждом микроскопе имеется бирка с надписью «МБИ-15», «МБИ-15-1», «МБИ-15-2» или «МБИ-15-3», товарный знак предприятия-изготовителя, порядковый номер, две первые цифры которого означают две последние цифры года выпуска микроскопа.
6. УКАЗАНИЯ МЕР БЕЗОПАСНОСТИ
При работе на микроскопе источниками опасности могут быть электрический ток и световое излучение.
Конструкция микроскопа и блоков питания исключает возможность случайного прикосновения к неизолированным цепям, находящимся под напряжением, а конструкция осветителей исключает попадание яркого света ламп в глаза исследователя.
Па корпусах блоков, входящих в комплект микроскопа, и штативе микроскопа установлены клеммы для подсоединения заземляющих проводов, обозначенные знаком заземления.
Перед началом работы корпуса микроскопа и блоков следует заземлить.
На съемной крышке узла установки фотоэлектронного умножителя установлен предостерегающий знак высокого напряжения.
7. ПОДГОТОВКА МИКРОСКОПА К РАБОТЕ
Микроскоп отправляется уложенным в упаковочный ящик, в котором помещены рабочий стол микроскопа, микроскоп в укладочном ящике, выносной пульт управления и осветители в укладочных ящиках, а также блок импульсной лампы в укладочном ящике.
При вскрытии упаковочного ящика аккуратно сиять верхнюю крышку а вынуть из ящика узлы и части микроскопа. Микроскоп вынимается из ящиков при отвинченных четырех болтах в дне.
Микроскоп рекомендуется устанавливать в помещении, где мало ощущаются толчки, вибрации и другие сотрясения, могущие повлиять на качество снимков при фотографировании.
Монтаж микроскопа производить в следующем порядке.:
Установить тумбы 56 (см. рис. 6) стола на пол, наложить на тумбы крышку стола и совместить отверстия в нижней части крышки с отверстиями угольников, укрепленных на тумбах; вставить в совмещенные отверстия болты и привернуть крышку стола к угольникам тумб.
Поставить микроскоп па амортизационную подставку так, чтобы штыри подставки вошли в отверстия основания микроскопа.
Установить осветители: один в рабочее положение на микроскоп, другой-на правую тумбу 56, как показано на рис. 7.
Осветитель с лампой ОП 12-100 установить в гнездо тубусодержателя микроскопа и закрепить винтом 77 (см. рис. 8).
При работе с ртутной лампой ДРШ250-3 установить в гнездо тубусодержателя теплопоглотительную кювету и закрепить ее винтом 77; на корпус кюветы в оправу коллектора надвинуть защитную втулку 63 (см. рис. 7), фонарь с ртутной лампой установить с помощью направляющей 130 (см. рис. 13) на угольник, укрепленный на основании микроскопа, и закрепить тормозным устройством 131.
В нерабочее время осветитель ОН 12-100 установить в гнездо нравом тумбы с задней стороны и закрепить соответствующим винтом. Фонарь с ртутной лампой и кюветой закрепить аналогично креплению на микроскопе на угольник, расположенный на правой тумбе.
8. ПОРЯДОК РАБОТЫ
8.1. Работа в проходящем свете
Для исследования и фотографирования объектов, изучаемых под микроскопом, в комплекте микроскопа предусмотрено три источника света. Тип источника света выбирает сам исследователь в зависимости от предполагаемого метода микроскопирования.
Для работы в проходящем и отраженном свете рекомендуется пользоваться лампой накаливания ОП12-100, питание которой осуществляется через унифицированный источник питания «Гранат». Порядок работы с источником питания «Гранат» изложен в его паспорте.
8.2. Выбор объективов
К микроскопу прилагается большой набор объективов, но в револьвер микроскопа рекомендуется устанавливать объективы нужного увеличения, выбранные из одной группы, в соответствии с табл. 2 и 3 настоящего описания.
Исследование объекта следует начинать с объективом наименьшего увеличения, который используется в качестве искателя при выборе участка объекта для более подробного изучения.
После того как с объективом малого увеличения (3,5; 9; 10) выбран участок для изучения, установите его с помощью механизма перемещения столика в центр поля микроскопа. (Если эта операция выполнена недостаточно аккуратно, интересующий наблюдателя участок не попадает в поле микроскопа более сильного объектива). Затем поверните револьвер для включения в ход лучей требуемого по увеличению объектива, сфокусируйте микроскоп на объект и, если нужно, подправьте настройку освещения.
На корпусе объективов масляной иммерсии имеется черное кольцо, на корпусе объективов водной иммерсии — белое кольцо.
Прежде чем перейти к работе с иммерсионным объективом, включите объектив 16х или 20х и как можно точнее приведите в центр поля микроскопа выбранный для исследования участок объекта. Затем стеклянной палочкой нанесите на фронтальную линзу иммерсионного объектива и на объект но кайле иммерсиоппого масла (или дистиллированной воды при работе с объективами водной иммерсии).
Для работы с малоконтрастными объектами рекомендуется использовать апертуру осветительной системы, не превышающую 2/3 апертуры иммерсионного объектива, поэтому наносить слой иммерсионной жидкости между фронтальной линзой конденсора и предметным стеклом препарата не требуется. В тех случаях, когда апертуру осветительной системы требуется довести до полной апертуры иммерсионного объектива, па фронтальную линзу конденсора нанесите несколько капель иммерсионного масла или воды, после чего конденсор поднимите до соприкосновения капли жидкости с предметным стеклом. При этом апертурную диафрагму откройте полностью. После работы иммерсионную жидкость с конденсора, объектива и объекта снимите тряпочкой или ватой, навернутой на деревянную палочку или спичку и слегка смоченной спиртом или ксилолом.
Фокусировку микроскопа при работе с сильными объективами производите так, чтобы не повредить объект и фронтальную линзу объектива.
Объективы водной иммерсии чувствительны к изменению толщины покровных стекол, так как показатель преломления воды отличается от показателя преломления покровного стекла. Наилучшее качество изображения с этими объективами можно получить только при применении покровных стекол толщиной 0,17 мм.
В слое жидкости между фронтальной линзой объектива с объектом на пути лучей не должно содержаться пузырьков воздуха.
Иммерсионный объектив 100x1,25 (масляная иммерсия) во избежание вывода из строя промывать только петролейиым эфиром или чистым бензином.
8.3. Работа в светлом поле с панкратическим конденсором ПК-3
При настройке снимите заглушку на основании микроскопа, установите на ее место узел апертурной диафрагмы 84 (см. рис. 8) и зажмите винт 83. Наденьте на вертикальные направляющие типа «ласточкин хвост» микрометрического механизма кронштейн 69 конденсоров, опустите его до упора и закрепите винтом; установите в кронштейн конденсор ПК-3, зажмите винт 122 (см. рис. 12) и поднимите конденсор до упора.
Вставьте в вертикальные направляющие микрометрического механизма предметный столик КС-2 и зажмите винт 114 (см. рис. 10). При установке скользящего столика (см. рис. 11) отожмите винт 112 (см. рис. 10), отвинтите (не до конца) центрировочные винты 113 и, притягивая верхнюю часть предметного столика к себе, выньте ее из кольца; в освободившееся кольцо столика вставьте скользящий столик. Включите в ход лучей разрешающая способность микроскопа. Для уменьшения освещенности изображения объекта вложите в гнездо осветителя один из нейтральных светофильтров или с помощью ручки регулирования выходного напряжения, расположенной на передней панели унифицированного источника питания «Гранат», снизьте накал лампы.
Выдвиньте рукоятку 94 (см. рис. 8), вращением диска 71 включите одно из увеличений насадки и приступайте к исследованиям.
8.4. Работа с телеобъективом и конденсором КОН-3 в светлом поле
и с конденсором ОИ-13 в темном поле.
Телеобъектив в оправе 103 (см. рис. 12) и конденсор КОН-3 123 при включенной в ход лучей ахроматической линзе рекомендуется применять при исследованиях, требующих малого увеличения (при изучении гистологических и анатомических крупных структур), или при обзорном фотографировании.
Для работы с телеобъективом в оправе 103 (см. рис. 9) снимите апертурную диафрагму и на ее место поставьте телеобъектив, после чего установите на кронштейн 69 (см. рис. 8) конденсор КОН-3 на собственном кронштейне (при работе в светлом иоле) или конденсор ОИ-13 128 (см. рис. 12) (при работе в темном поле).
Включите в ход лучей ахроматическую линзу 15 (см. рис. 1), для чего рукоятку 101 (см. рис. 9) переместите на себя до упора.
При настройке освещения для обзорной работы необходимо включить в ход лучей объектив 3,5х или 9х.
Для наблюдения изображения источника света положите матовое стекло па оправу 103 телеобъектива. Установите рукоятку 76 (см. рис. 7) коллектора в среднее положение и, наблюдая за изображением нитей лампы на матовом стекле, перемещайте лампу вдоль оси до появления наиболее резкого изображения нитей лампы; закрепите лампу винтом 74 и с помощью винтов 75 приведите изображение нитей лампы в центричное положение относительно оправы 103 (см. рис. 9) телеобъектива. После этого снимите матовое стекло.
Включите увеличение 1 насадки. Вращением рукояток 85 (см. рис. 8) сфокусируйте микроскоп на объект. Поворотом рукоятки 126 (см. рис. 12) прикройте апертурную диафрагму, а с помощью рукоятки 81 (см. рис. 8) прикройте полевую диафрагму.
Приведите изображение полевой диафрагмы с помощью винтов 82 в центр поля микроскопа и откройте ее так, чтобы изображение ее краев выступало за пределы поля микроскопа. Если изображение полевой диафрагмы меньше поля микроскопа, то введите в ход лучей дополнительную линзу конденсора.
8.5. Работа по методу фазового контраста
Метод фазового контраста предназначается для исследований неокрашенных препаратов и живых объектов, так как при работе по этому методу повышается контрастность изображения.
При работе по методу фазового контраста необходимо применять кольцевую диафрагму 162, фазовые ахроматические объективы 20х, 40х и 90х, апохроматический объектив 70х и зеленый светофильтр.
Настройку освещения осуществляйте так же, как для работы с панкратическим конденсором ПК-3.
После настройки освещения откройте полностью апертурную диафрагму и раскройте полевую диафрагму строго по полю, что способствует предохранению объекта от излишней засветки рассеянным светом. Откройте крышку осветителя и установите в гнездо светофильтр, вверните в револьвер группу фазовых объективов, введите в ход лучей объектив 20х и сфокусируйте микроскоп на объект. Установите с помощью кольца апертуру конденсора по апертуре объектива, включите в ход лучей бинокулярной насадки систему линз с гравировкой «ФК», сфокусируйте систему, наблюдая в окуляр, на фазовое кольцо объектива, вложите в оправу апертурной диафрагмы кольцевую диафрагму; изображение диафрагмы может быть меньше или больше фазового кольца объектива и расположено не центрично по отношению к нему.
Вращая кольцевую диафрагму и перемещая ее, совместите изображение кольцевой диафрагмы с изображением фазового кольца объектива. Вращением кольца с апертурной шкалой конденсора ПК-3 добейтесь такого положения, при котором светлое изображение кольцевой диафрагмы будет перекрываться изображением темного фазового кольца объектива. Нельзя допускать, чтобы изображение кольцевой диафрагмы выступало за изображение фазового кольца, так как это сильно снижает контрастность изображения объекта.
Включите в ход лучей одно из увеличений насадки, проверьте центричность полевой диафрагмы, если нужно, то приведите ее в центр поля микроскопа и откройте строго по полю, после чего приступайте к исследованиям.
Помните, что после смены объектива или препарата необходимо заново проверить центрировку кольцевой диафрагмы, фазового кольца и полевой диафрагмы, так как только после этого будет обеспечена надлежащая контрастность.
8.6. Работа в поляризованном свете
Для исследования объектов в поляризованном свете применяют два поляризационных светофильтра, один из которых выполняет функции поляризатора 163, другой — анализатора 164.
Для работы в поляризованном свете настройку освещения производите так же, как для работы с панкратическим конденсором ПК-3 или с телеобъективом и конденсором КОН-3 в зависимости от применяемых объективов.
После настройки освещения вставьте в оправу апертурной диафрагмы 84 (см. рис. 8) микроскопа или в оправу телеобъектива поляризационный фильтр-поляризатор и вверните в бинокулярную насадку (снизу) поляризационный фильтр-анализатор. Выведите из поля микроскопа изображение объекта и вращением оправы апертурной диафрагмы (или светофильтра в оправе на телеобъективе) скрестите поляризатор и анализатор, т. е. добейтесь более полного гашения. Введите в поле микроскопа изображение объекта. При повороте предметного столика с объектом можно наблюдать анизотропию объекта. Предварительно произведите центрировку столика, т.е. совместите ось вращения столика с визирной осью микроскопа или с центром поля микроскопа, как указано ниже.
Примечание. Прибор не обеспечивает проведения исследований в поляризованных лучах. Введение поляроидов позволяет лишь получать более контрастные изображения некоторых объектов.
8.7. Работа с центрировочной пластиной
Центрировочная пластина служит для быстрого совмещения оси вращения предметного столика 68 с центром поля микроскопа. На ярлыке пластины записаны координаты совмещенного положения перекрестия пластины с осью вращения столика.
Центрировочную пластину установите на столике так, чтобы ярлык пластины расположился около подвижного держателя 108
(см. рис. 10) препаратоводителя. В этом положении отожмите один из винтов 109 и установите неподвижный держатель 107 строго на совмещение с риской. Далее вращением рукояток 105 и 106 установите отсчеты на шкалах по координатам, записанным на ярлыке пластины. Вверните в револьвер объектив малого увеличения, вставьте в бинокулярную насадку окуляры 4х (один с перекрестием) и включите увеличение 1 насадки. Настройте освещение, сфокусируйте микроскоп на перекрестие центрировочной пластины и вращением центрировочных винтов 113 совместите перекрестие пластины с перекрестием окуляра. Отожмите винт 112 и, наблюдая в окуляр, поворачивайте верхнюю часть столика вокруг оси примерно на 180°; заметьте, на какую величину смещается ось вращения столика относительно перекрестия окуляра (ось вращения столика проходит через центр окружности, которую описывает перекрестие центрировочной пластины при вращении столика). В том случае, если ось вращения не будет совпадать с перекрестием окуляра, центрировочными винтами 113 столика совместите ее с перекрестием окуляра, а затем рукоятками 105, 106 совместите перекрестие центрировочной пластины с перекрестием окуляра. Снова поверните столик вокруг оси и снова заметьте смещение оси вращения столика относительно перекрестия окуляра. Повторяя указанные выше действия несколько раз, добейтесь, чтобы смещение оси вращения столика относительно перекрестия окуляра было минимальным.
После того как будет достигнуто совмещение оси вращения столика с перекрестием окуляра, при дальнейшей работе центрировочные винты 113 трогать нельзя; для перемещения препарата нужно пользоваться рукоятками 105 и 106.
В отцентрированном положении столика выньте цептрировочную пластину и установите исследуемый объект в держатели 107 и 108, для просмотра объекта пользуйтесь рукоятками 105 и 106.
Если необходимо зафиксировать положение препарата для его вторичного отыскания, на предметном стекле препарата следует записать его координаты по шкалам препаратоводителя. Такая фиксация координат препарата поможет быстрее повторно ввести в поле микроскопа интересующий участок препарата.
Для этого центрировочную пластину установите на столик и по шкалам столика установите отсчеты согласно координатам, записанным на пластине. Изображение перекрестия пластины совместите винтами 113 с перекрестием окуляра, после чего вместо центрировочной пластины поставьте препарат. По шкалам столика установите координаты, указанные па предметном стекле препарата.
8.8. Работа в отраженном (падающем) свете в светлом и темном поле
При подготовке к работе в светлом поле выдвиньте из основания правую рукоятку 78 (см. рис. 8) для включения в ход лучей зеркала и направления пучка лучей от лампы в осветительную систему отраженного света. Выдвиньте рукоятку 80 для включения в ход лучен отражателя светлого поля, выключите перемещением рукоятки 101 (см. рис. 9) ахроматическую линзу, откроите полностью с помощью рукоятки 99 апертурную диафрагму и рукояткой 90 (см. рис. 8) — полевую диафрагму. Положите матовое стекло на предметный столик при снятом объективе и, перемещая лампу с помощью винтов 75 (см. рис. 7) и коллектор с помощью рукоятки 76, добейтесь резкого изображения нити лампы на матовом стекле и центричного ее расположения относительно отверстия под объектив.
После настройки освещения вверните в револьвер эпиобъективы, установите на предметный столик объект, включите в ход лучей увеличение 1 насадки и вращением рукояток 85, 86 сфокусируйте микроскоп па объект. Затем с помощью винтов 91 отцентрируйте изображение полевой диафрагмы в поле окуляра, откройте полевую диафрагму в соответствии с полем зрения окуляра и, пользуясь рукояткой 99 (см. рис. 9), откройте апертурную диафрагму. Степень раскрытия диафрагмы определите при наблюдении в бинокулярную насадку, в которой при этом должна быть включена оптическая система с гравировкой «ФК».
Для работы в темном поле, вдвинув рукоятку 80 (см. рис. 8) до упора, включите кольцевое зеркало и откройте полностью апертурную и полевую диафрагмы.
8.9. Работа при смешанном освещении объекта
Смешанное освещение, т.e. освещение объекта одновременно проходящим и падающим светом, применяют при исследовании полупрозрачных объектов как в светлом, так и в темпом поле.
При переходе па смешанное освещение включите в ход лучей светоделительную пластинку, для чего выдвиньте рукоятку СМЕШАННЫЙ СВЕТ (слева от исследователя) до отказа. В этом случае приблизительно 50% света направляется в систему для освещения объекта проходящим светом и приблизительно 50% в систему для освещения объекта падающим светом. Настройку каждой из систем производите, как указано выше.
При микроскопе, настроенном для работы в проходящем свете, одновременное освещение объекта падающим светом позволяет получить четкое изображение контура объекта и его внутренней структуры. При микроскопе, настроенном для работы в падающем свете, одновременное освещение объекта проходящим светом хорошо разрешает наружную структуру объекта (становятся видны мелкие ворсинки, выступы, грани). Исследователь сам выбирает способ освещения.
8.10. Работа в свете люминесценции объектов
Исследования объектов в свете люминесценции можно производить в светлом иоле при освещении объектов снизу, через конденсор. и в темном и светлом ноле при освещении объектов сверху, через объектив.
Кроме того, исследование объектов можно производить при смешанном освещении, т.е. при сочетании освещения препаратов сверху светом, возбуждающим люминесценцию препарата, с одновременным освещением снизу но методу темного поля или фазового контраста.
8.10.1. Настройка микроскопа для исследования объектов в свете люминесценции
при освещении их снизу, через конденсор
При настройке микроскопа отожмите винт 77, снимите осветитель с лампой накаливания, установите на его место кювету 62 (см. рис. 13), наполненную дистиллированной водой или 4-процентным раствором медного купороса, поставьте на направляющие угольника осветитель с ртутной лампой ДРШ250-3, предварительно надев защитную втулку 63, и закрепите его с помощью тормозного устройства 131.
Установите на место апертурной диафрагмы телеобъектив в оправе 103 (см. рис. 12), наденьте на направляющие для конденсоров кронштейн с конденсором КОН-3. Пользуясь описанием блока, зажгите ртутную лампу.
Вверните в револьвер микроскопа объективы с награвированной буквой «Л» для исследований в свете люминесценции объектов (см. табл. 4). Перемещением рукоятки 101 (см. рис. 9) на себя включите ахроматическую линзу. Рукоятки смешанного и отраженного света и рукоятка 80 (см. рис. 8) должны быть вдвинуты до упора.
Поднимите конденсор до упора. На оправу телеобъектива положите матовое стекло и с помощью рукояток 134 (см. рис. 13) и 135 добейтесь центричного положения изображения тела лампы относительно телеобъектива. Рукоятка 137 коллектора при этом должна быть в среднем положении.
Уберите матовое стекло. Светофильтры для возбуждения люминесценции установите на оправу телеобъектива.
Выберите запирающий светофильтр и включите его в ход лучей поворотом диска 102 (см. рис. 9).
Включите в ход лучей объектив 10x0,40, закрепите на предметном столике исследуемый объект. В насадку вставьте окуляры 4х, причем в левую трубку — окуляр с перекрестием. Механизм диоптрийной подвижки окулярной трубки насадки установите на «0» и, наблюдая в окуляр правой трубки, сфокусируйте микроскоп на объект. Не трогая рукояток микрометрического механизма, перемещением глазной линзы окуляра (в левой трубке насадки) добейтесь резкого изображения объекта.
В случае недостаточной освещенности объекта включите в ход лучей призму 34 (см. рис. 1), для чего рукоятку 96 (см. рис. 8) выдвиньте из корпуса головки до отказа. Откройте полностью апертурную диафрагму.
Включите увеличение 1 насадки. Поворотом рукоятки 81 закройте полевую диафрагму. Ненамного прикройте апертурную диафрагму конденсора. Перемещением конденсора по высоте добейтесь такого положения, при котором в поле микроскопа будет резко видна полевая диафрагма. Вращением винтов 82 приведите изображение полевой диафрагмы в центр ноля окуляра, после чего раскроите полевую диафрагму до размеров поля окуляра, а апертурную примерно на 2/3 диаметра выходного зрачка объектива.
Перемещением коллектора с помощью рукоятки 137 (см. рис. 13) добейтесь наилучшей освещенности в плоскости объекта.
Переход от работы с объективом малого увеличения к работе с объективом большего увеличения и с иммерсионными объективами осуществляйте с соблюдением всех указании подраздела 8.2 настоящего описания.
При перерывах в работе рекомендуется с помощью рукоятки 138 включать в ход лучей предохранительную шторку, которая защищает объекты от вредного действия светового потока.
Снимать кювету с прибора при включенной лампе ДРШ250-3 или незакрытой шторке нельзя.
8.10.2. Настройка микроскопа для исследований в свете люминесценции объектов
при освещении их сверху, через объектив, в светлом и темном поле.
Освещение объектов сверху, через объектив, имеет значительные преимущества перед освещением снизу, через конденсор, так как изображение объекта становится значительно ярче. Освещение сверху применяется при работе с сильными объективами с большой апертурой (0,65—1,25), а также при исследовании толстых прозрачных и непрозрачных объектов.
При настройке микроскопа для работы в светлом поле вверните в револьвер объективы, рассчитанные па длину тубуса 160 мм, или эпиобъективы, рассчитанные па длину тубуса 190 мм. Вставьте в бинокулярную насадку, установленную на головку микроскопа, окуляр 4х. Установите в гнездо 88 (см. рис. 8) тубусодержателя необходимые светофильтры возбуждения в зависимости от характеристик объектов и применяемых флюорохромов.
Выберите и введите в ход лучей один из «запирающих» светофильтров; введите в ход лучей светоделительную пластинку, для чего рукоятку 80 установите в положение «Л», выдвинув ее до упора. Выдвиньте до упора рукоятку 78 для включения зеркала, направляющего свет в систему отраженного света. Пользуясь техническим описанием и инструкцией по эксплуатации блока питания лампы ДРШ250-3, зажгите лампу.
Поворотом револьвера введите в ход лучей отверстие револьвера без объектива, положите матовое стекло или лист бумаги на предметный столик, па котором должно быть видно изображение источника света. Перемещением коллектора с помощью рукоятки 137 (см. рис. 13) и центрировкой лампы с помощью рукояток 134 и 135 добейтесь резкого и наиболее центричного расположения изображения яркой части светящегося тела лампы относительно отверстия под объектив. Включите в ход лучей объектив малого увеличения, поместите на предметный столик исследуемый объект и сфокусируйте на него микроскоп. При установке больших объектов снимите апертурную диафрагму для проходящего света и конденсор и опустите предметный столик на столько, на сколько это требуется по условиям фокусировки. После этого с помощью рукоятки 90 (см. рис. 8) прикройте полевую диафрагму, с помощью рукоятки 99 (см. рис. 9) —апертурную диафрагму и вращением винтов 91 (см. рис. 8) приведите изображение полевой диафрагмы в центр поля окуляра, после чего откройте полевую диафрагму по размерам поля окуляра.
При работе с эпиобъективами 21х0,40Л и 40х0,65Л апертурную диафрагму открывают полностью, при работе с объективами, рассчитанными на тубус 160 мм,—по размерам выходного зрачка объектива.
После настройки освещения включите выбранное увеличение насадки и приступите к исследованиям в светлом поле.
Во время работы добейтесь наилучшей освещенности объекта перемещением коллектора с помощью рукоятки 137 (см. рис. 13).
При перерывах в работе вращением рукоятки 138 включите защитную шторку для предохранения объекта от излишней засветки.
Для перехода к работе в темном поле выведите из хода лучей светоделительную пластинку и включите кольцевое зеркало, для чего рукоятку 80 (см. рис. 8) вдвиньте до упора, полностью откройте полевую и апертурную диафрагмы.
8.10.3. Настройка микроскопа для исследований объектов при смешанном освещении
Для одновременного освещения объектов проходящим и отраженным светом включите в ход лучей светоделительную пластинку, расположенную слева в основании микроскопа, для чего выдвиньте до отказа рукоятку СМЕШАННЫЙ СВЕТ. На пластинке 26 (см. рис. 1) имеется интерференционное покрытие, отражающее сине-фиолетовые лучи в систему отраженного света и пропускающее желто-зеленые лучи в систему проходящего света.
Исследователь сам выбирает способ освещения в зависимости от характеристик объекта.
При одновременном наблюдении изображения объекта в свете люминесценции и по методу фазового контраста применяют любой светофильтр из комплекта микроскопа (СС15, ОСП, КС 11, НС10, НСЗ или ЗС11), причем светофильтр выбирают так, чтобы его цвет не совпадал с цветом люминесценции. Светофильтр устанавливают под конденсор.
При смешанном освещении объекта можно падающим светом сверху возбуждать люминесценцию объекта, а снизу проходящим светом подсвечивать объект по методу фазового контраста или темного поля, используя соответственно конденсор ПК-3 или ОИ-13. Настройку освещения в этом случае осуществляют, как указано в подразделах 8.4 и 8.5 настоящего описания.
8.11. Фотографирование
Фотографирование изучаемых под микроскопом объектов может производиться при всех методах микроскопирования.
Для того чтобы направить световой поток в плоскость пленки (или пластинки), включите в ход лучей светоделительную призму, вдвиньте рукоятку 96 (см. рис. 8) до упора. Настройте освещение в зависимости от выбранного метода микроскопирования. Совместите ось вращения предметного столика с оптической осью микроскопа, как указано в подразделе 8.7 настоящего описания. Это необходимо для того, чтобы при повороте столика объект не выходил из поля микроскопа и кадра фотокамеры. Приведите в центр поля тот участок объекта, который предполагается фотографировать.
Снимите с корпуса тубусодержателя крышку и установите одну из прилагаемых фотокамер.
Откройте крышку 165 (рис. 8), вставьте в держатель фотоокуляр, соответствующий выбранному объективу (см. табл. 2, 3, 4 настоящего описания).