Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему: Биологические особенности бактерий рода Morganelle и ускоренная индикация их в объектах ветеринарного надзора
Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Биологические особенности бактерий рода Morganelle и ускоренная индикация их в объектах ветеринарного надзора
На правах декоре it
БРИТОЗА СОЗЬЯ ВАСИЛЬЕВНА
БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ БАКТЕРИЙ РОЛА MORGANEI.LA И УСКОРЕННАЯ ИНДИКАЦИЯ ИХ В ОШКТАХ ЕЕТЕРЯНАРНОГО НАДЗОРА
16.00.03. Зетеркк&ркая микробиология, вирусология, эпизоотология, микология и тлукология
АВТОРЕ 5 ЕР А'Т диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных, наук
Работа выполнена во Всероссийском научно-исследовательском институте ветеринарной санитарии, гигиены и экологии
Научный руководитель: доктор ветеринарных наук
Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук
В.Г.ИВАНОВ (ВНИИВСГЭ), кандидат ветеринарных наук О.А.ТУГАРИНОВ (ВГНКИ
Ведупхш организация - Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им. Я.Р.Коваленко
Защита состоится 1897 г. в /О час.
на заседании диссертационного совета Д. 020.50.01 при Всероссийском научно-исследовательском институте ветеринарной санитарии, гигиены и экологии (128022, Москва, Звенигородское шоссе, 6).
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Всероссийского научно-исследовательского института ветеринарной санитарии, гигиены и экологии.
Автореферат разослан "10" г.
Ученый секретарь диссертационного совета, кандидат биологических наук
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность теш. Массовые яелудочно-кишечные заболевания новорожденных телят и поросят-сссунов иыепт повсеместное распространение и накосят значительный зкономический ущерб хозяйствам, особенно крупным гшвотноводческиы фермам ввиду высокой эаболевае-цостн и падежа молодняка, а такте больших затрат на лечение больных животных. В преобладающей большинстве случаев эти заболевания •шепт инфекционную природу и обусловлены разнообразными агентами. Работами многих исследователей (3.Л.Светоч,1972; Р.А.Хабибуллин, 1972; О. А.Полякова. 1976; Л.С.Каврук.Шб; Е.С.Воронин,1989; Л.Т. Парайко.1992; С.Н.Золотухин,1992,1694; D.S.Waldhalm н сотр.,1969; O.Krcgstad.1974; D.R.Osens н сотр.,1974; H.J.Robson, 1974; M.Tsu-bokura и сотр.,1976; S.I.Chrlstonsen, 16SQ; I. J.ü5CCo,1982; C.H. Collins. 1935 и др.) отазчена существенная роль грамотрицателышх условно-патогенных зктерсбакторий в этиологии инфекционной диареи молодняка, которая протекает в виде энзоотических вспышек 5» чаш всего в Форме созванной кнфзгада.
Проведецкш нами исследования по нэучеик» видового состава условно-патогеияой иккрофлоры репродукторных пододанкй сейноёод-' чзских и молочных ферм нотазази, что во шгагяг свкноводчзскнх и ыолочшй фэрдех при иеосовых 2шдуяочно-юйезчшйс 8азо®ввякя* поросят-сосунов 5! ноЕсргэдешшх телят sapssay а кввасшши вошЗудителя-ыи диарзн, ОТНОСЙЕЩШ5СЯ к родам Escherichia, Proteus, Cltrofcacter я др. встречаются бактерии рода Mbrgsaalla (вид 1!. ыоргаз-д>, обладавшие патогенное тъю для лабораторных зевотных. Роль ыикро-оргашзяов а этиологии г-»:«7дочго- кргэт'йж аабагэвшшй ыолодняка се&скохсшсйсгввшшх яивотанх долгое время оставалась ш кзугэпноЭ КЭ.Ч И UOCTO ИХ В С0Е5ЭЙ СТр^Яура ЕОЗбудXTQ&úfí УКШЯ1Ш забОДвВа-
кий Обтазадся открыли ms® вопрос, нухао ли яришшать so вни-
мание морганеллы при санитарно-бактериологической оценке помещений животноводческих ферм.
Существующий бактериологический метод обнаружения морганелл требует продолжительного времени (до б суток), ввиду чего актуальной задачей является изыскание более быстрого и доступного широкой практике метода индикации данных бактерий во внешней среде и патологическом-материале. Этим требованиям могут отвечать более совершенные серологические методы индикации микроорганизмов, для разработки которых важно знать, какие серологические группы и се-ровары бактерий наиболее часто циркулируют на животноводческих фермах разных регионов страны и какие диагностические сыворотки необходимо иметь для их серологической идентификации.
Цель и задачи исследований. Цель настоящей работы сводилась к определению места морганелл в общей структуре возбудителей диа-рейных заболеваний молодняка сельскохозяйственных животных, изучению их биологических свойств и усовершенствована метода индикации этих бактерий в объектах внешней среды и патнатериале.
Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:
- изучить распространенность бактерий вида М.тогкапН в реп-родукторных помещениях молочных к свиноводческих ферм:
- изучить продолжительность выживания морганелл в разных объектах внешней среды и возможность изменчивости их культураль-но-биохимических, антигенных и патогенных свойств при обитании в этих объектах;
- определить устойчивость морганелл к различным дезинфицирующим средствам и температурным режимам;
- получить активные агглютинирующие О-сыворотки к разным стамыам морганелл, выделенным из помещений животноводческих ферм
и патологического материала;
- изучить антигенные свойства полевых штаммов морганелл с помощью экспериментально полученных морганеллезкых агглютинирующих О-сывороток и установить доминирующие серогруппы этих бактерий, имеющие эпнзоотологическое значение;
- провести серологически маркировку полевых атаымов морганелл с помощь» международной коллекции эталонных штатов названных бактерий;
- изыскать ускоренный метод индикации бактерий вида Ы.тогеапИ во внесшей среде, кормах и патологическом материале:
Научная новизна. Изучена распространенность бактерий вида Моггапе11а глгеапИ в гагаотназогчес(асх хозяйствах различных регионов страны. Определены сроки выживания морганелл в разных объектах внешей среды: сточных водах, почве, навоза. а также на деревянных. керамических н датаялических поверхностях. Изучена устойчивость этих бактерий к некоторым дезинфицирующим средстваы м действия высоких температур.
Установлены доиинкрущиэ сорогрушш морганелл, ццркудкру^й на животноводческих ферказ и ншдаэ эпизоотодогичсскэв значение. Выявлены две новые серогруппы каатсс бактерий. озаг-шгзгзея по антигенному строение от нзгестных серсгрупп мездународаой ксшзк-ют. Бактерии серогруппы "13я использованы в кздосгвэ прсиэсоло-твекяого втаьш мм кзгогомшш кабороз ¿юргзяедоэзных аггали-ннрузкзих серогруппозых сызорогогс, укзгеягяй зазг™он авторским свидетельство1.
Определены оппаеалыш узлсзкя кул&тивщтешпш зсаотеогого стафилококка пт.иш споссбсгвукщш манстэдьвом/ нзкоша-
нка белка А в- тетках этого ш?аша. Разрйогаа £тфое$нкый способ "останозкя реакция коаггйэткЕацгш для ускоренней иэтдгткацкн корга-
нелл ео внешней среде, кормах и патологическом материале.
Практическая ценность. Установленные более короткие сроки выживания морганелл во внешней среде по сравнению с другими видами энтероОактерий, их значительно меньшая чем у эшерихий устойчивость к девнифектантам, позволяют рекомендовать при обнаружении их на животноводческих фермах проведение ветеринарно-санитарных мероприятий как при колибактериоае.
Разработанные диагностические средства (набор агглютинирующих серогрупповых сывороток 8 типов), используемые при индикации М.тоггапи с помощью реакции коагглютинации, дают возможность проводить ускоренное обнаружение их во внешней среде, кормах и патологическом материале с высокой результативность». При отсутствии коммерческого стафилококкового реагента, содержащего белок А. предложен оптимальный режим культивирования золотистого стафилококка штамм Сшап-1, обеспечивающий высокий уровень накопления белка А, что позволяет готовить стафилококковый реагент в лабораторных условиях.
Реализация результатов исследований. Результаты работы вошли в "Методические указания по ускоренной индикации морганелл, сальмонелл и энтеропатогеняьк эоерихий. с адгезивными антигенами К88 и К99 в объектах внешней среды, кормах и патологическом материале при помощи реакции коагглютинации"; "Методические указания по бактериологической диагностике смешанной кишечной инфекции молодняка животных, вызываемой патогенными знтеробактериями"; " Инструкцию по изготовлению и контролю набора сывороток нативных мор-ганеллезных агглютинирующих серогрупповых"; "Технические условия на набор сывороток нативных морганеллезных агглютинирующих серогрупповых" и "Наставление по применению набора сывороток нативных морганеллезных агглютинирующих серогрупповых".
Апробация работы. Материалы диссертации доложены на научно-практической республиканской (Украина) конференции "Повышение эффективности ветеринарного обеспечения промышленного свиноводства" (г.Киев,1987); Всесоюзной конференции "Эпизоотология, эпидемиология , средства диагностики, терапии и специфической профилактики инфекционных болезней, обзщх для человека и кивотных" (г.Львов.1988); Всероссийской научно-производственной конференции "Гигиена, ветсанитарш и экология животноводства" (г.Чебоксары, 1694) и межлабораторном совещании научных сотрудников ВНИИ ветеринарной санитарии, гигиены и зкологш (1996).
Опытно-промышленная партия наборов моргаиедлеаных агглютини-руюаих серогрупповых сывороток в 1990 г. успешно прояла приемочные испытания и производственную апробацию в двух республшсансюпс и пяти областных ветлабор&тсриях. Набор« сывороток демонстрировались в 1990 г. на ВДНХ СССР, за разработку и Екэдрение которых автор награжден серебряной иедадыз выставки.
Публикации. По теме диссертации опубликовано 0 научных статей.
Объем и структура работы. Диссертация состой? из введения, обзора литературы, собственных кссдедоваякй, обсущонкя полученных результатов, выводов, предзояений производству, сяиста литературы и приложений.
Работа нздояепа на 112. страницах ыатенопнопого текста, иллюстрирована 12 таблицами и 2 рисунками. Список зэтерадуры втачав* 125 нсточшзсов о?ечествоиннх и гарубзшшх авторов.
Натерпвдь;, изчот и иесто кроаэдонля Езследоааикй. Эксперикеитальш.'з исследования проводились а иэркод 1981-1996 гг. J л Зоратории санитарнса микробиологии Есэроссийгксго научко-кс-
следовательского института ветеринарной санитарии, гигиены и экологии (ВНИИВСГЭ), на базе животноводческих ферм Московской, Пензе некой, Липецкой, Тульской, Ивановской, Винницкой областей и Краснодарского края. В опытах использовали полевые штаммы M.morganii 10 серогрупп, международную коллекцию морганелл 46 серогрупп, полученную из Будапештского медицинского университета, 10 музейных штаммов P.morganil и штамм болотистого стафилококка Cowan-1, полученные из ГИСК им.Тарасевича, и разные штаммы энтеробактерий из коллекции лаборатории санитарной микробиологии. В исследованиях были использованы 80 кроликов, 256 белых мышей, родовую и видовую идентификацию проводили у 890 культур микроорганизмов.
Материалом для изучения видового состава условно-патогенной микрофлоры помещений являлись сборные пробы соскобов с полов и фекалии клинически здоровых и больных диареей поросят-сосунов и новорожденных телят, а также внутренние органы и ткани трупов молодняка, погибшего от желудочно-кшпечннх заболеваний. Для выделения энтеробактерий использовали общепринятые микробиологические методы, родовую и видовую идентификацию выделенных культур микроорганизмов проводили согласно международной классификации бактерий семейства Enterobacterial аэ (1963) и руководству по систематике бактерий Бэргн (1984), используя 19 тестов.
Бактериологическое исследование трупов новорожденных телят и поросят-сосунов проводили согласно действующим методическим указаниям по бактериологической диагностике колибактериоза (эиерихи-оэа) животных (1974,1981) и сальмонеллезов животных (1971,1990).
Патогенные свойства морганелл определяли в биопробе на белых мышах весом 13-15 г, заражая их внутрибрюаинно в дозах 500 мля-1 млрд м.к. Каждой дозой и штаммом заражали 3-4-х мышей.
Гемолитические свойства изучали на кровяном