Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему: МЕТОДЫ ПРИМЕНЕНИЯ И ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРОЛОНГИРОВАННЫХ ТЕТРАЦИКЛИНОВЫХ АНТИБИОТИКОВ ПРИ ПУЛЛОРОЗЕ-ТИФЕ И СПИРОХЕТОЗЕ ПТИЦ
Автореферат диссертации по ветеринарии на тему МЕТОДЫ ПРИМЕНЕНИЯ И ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРОЛОНГИРОВАННЫХ ТЕТРАЦИКЛИНОВЫХ АНТИБИОТИКОВ ПРИ ПУЛЛОРОЗЕ-ТИФЕ И СПИРОХЕТОЗЕ ПТИЦ
ВСЕСОЮЗНЫЙ ОРДЕНА ЛЕНИНА ИНСТИТУТ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ВЕТЕРИНАРИИ
ВСЕСОЮЗНОЙ ОРДЕНА ЛЕНИНА АКАДЕМИИ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ НАУК ИМЕНИ В. И, ЛЕНИНА
> ■ На правах рукописи
ШКАРИН Николай Васильевич -
МЕТОДЫ ПРИМЕНЕНИЯ И ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРОЛОНГИРОВАННЫХ ТЕТРАЦИКЛИНОВЫХ АНТИБИОТИКОВ ПРИ ПУЛЛОРОЗЕ-ТИФЕ И СПИРОХЕТОЗЕ ПТИЦ
<16.00.03 — Ветеринарная микробиология, эпизоотология, микология)
диссертации на соискание ученой степени кандидат« ветеринарных наук .
всесоюзный ордена ленина институт
всесоюзной ордена ленина академии сельскохозяйственных наук имени в, и. ленина
На правах рукописи ШКАРИН Николай Васильевич
МЕТОДЫ ПРИМЕНЕНИЯ И ЭФФЕКТИВНОСТЬ . ПРОЛОНГИРОВАННЫХ ТЕТРАЦИКЛИНОВЫХ АНТИБИОТИКОВ ПРИ ПУЛЛОРОЗЕ-ТИФЕ И СПИРОХЕТОЗЕ ПТИЦ
(16.00.03 — Ветеринарная микробиология, эпизоотология, микология)
диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук
Работа выполнена в Пятигорской межобластной ветеринарной лаборатории по борьбе с болезнями птиц н в лаборатории антибиотиков и микологии ВИЭВ.
Диссертация на русском языке, изложена на 116 стр. машинописи и включает введение 2 стр., обзор литературы — 32 стр., собственные исследования —79 стр., выводы—2стр.г приложение—16 стр. Список не пользованной литературы включает 287 источников, в т. ч. 87 иностранных работ.
Научный руководитель — профессор Саркнсов А. X., доктор биологических наук, заслуженный деятель науки РСФСР, лауреат Государственной премии СССР,
1, Г. А. Грошева, доктор ветеринарных наук.
2. К, С. Масловскнй, кандидат ветеринарных наук.
Ведущее учреждение — Всесоюзный научно-исследовательский институт по изучению болезней птиц.
в 14 часов на заседании Ученого совета Всесоюзного ордена Ленина института экспериментальной ветеринарии по адресу: Москва, 109472. Кузьминки, ВИЭВ.
Автореферат разослан Защита состоится — _
Ученый секретарь — кандидат биологических наук
В решении задач полного удовлетворения . населения в продуктах питания большая роль отводится птицеводству, важным этапом развития которого служит постановление Центрального Комитета КПСС и Сонета Министров СССР от 1964 года «Об организации производства яиц и мяса птицы па промышленной основе».
Обязательным условием развития птицеводства и повышения продуктивности птиц является совершенствование мер борьбы с инфекционными и паразитарными болезнями птиц, среди которых пуллороз-тиф и спнрохетоз ежегодно наносят большой ущерб птицеводству.
В последние тоды в нашей стране и за рубежом ори слиро-хетозе Н особенно пуллорозе-тифе птиц испытано и применено большое количество антибиотиков и химиотералевтическнх средств, оказавшихся в различной степени эффективными при данных заболеваниях (Л. Питал, 1954; 3. Палатка, 1956; К. Гордон, 1955; А. X. Саркисов с сотр., 1958; М. А, Артемичев, 1958; А. Г. Малявин, 1959; И. М. Беспалов, 1960; В. Ф. Грезнп, 1965; В. И. Зюбап, 1965; С. А. Воробьев, 1968; С. *Г. Щеннпков, 1968; В. 3. Решетпяк, 1971 и др.).
Разработка мер борьбы с пуллорозом-тифом и спнрохето-■юм продолжает оставаться актуальной задачей и в настоящее прем я.
Многие авторы отмечают, что в результате широкого применения антибиотиков в качестве стимуляторов [роста, а также длительного использования их с лечебно-профилактической целью при инфекционных заболеваниях животных н птиц происходит образование устойчивых популяций микроорганизмов (Я. Е. Кол яков, 1962; В. В. Кузьмин и И. М. Терешин, 1962; М. Н, Лебедевц С. Д. Воропаева, 1960; Е. Т. Тришкина, 1969; Ф. С. Киржаев, С. А. Артемьева и другие, 1970),
Появление антнбнотнкоустойчивых штаммов возбудителе!*! заболеваний является серьезной проблемой в ветеринарии и особенно в медицине. Изыскание новых препаратов и совершенствование методов применения широко применяемых в настоящее время антибиотиков, направленных иа преодоление лекарственной устойчивости микроорганизмов, имеет важное теоретическое п практическое значение.
За последние годы перечень лекарственных средств, выпускаемых нашей промышленностью, обогатился антибиотиками пролонгированного действия, которые нашли широкое применение и в ветеринарии. Учитывая большие перспективы использования пролонгированных антибиотиков при болезнях ттн, мы задались целью изучить эффективность и разработать методы применения'некоторых из них при пуллорозе-тн-фе и опцрохстозе птиц. В соответствии с этим к разрешению были поставлены следующие задачи:
1. Изучить чувствительность местных штаммов возбудителя пуллороза-тифа к антибиотикам тетрацнклннового ряда.
2. Выяснить кинетику хлортетрациклнна в организме ни-' дюшат при парентеральном введении пролонгированного антибиотика дибномицина.
3. Установить острую токсичность для индюшат новой лекарственной формы хлортетрациклика — днбиоветипа.
4. Испытать в эксперименте профилактическую и лечебную эффективность дибномицина и днтетраииклгша при пул-лорозе-тпфе и опирохетозе птиц.
5. Испытать непосредственно в производственных условиях лечебно-профилактическую эффективность дибиамнцина и литетрациклина при естественном течении пуллороза-тифа индюшат, цыплят и спирохетозе ПТИЦ.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Экспериментальная часть работы выполнена в Пятигорской межобластной ветлабораторип по борьбе с болезнями птиц и в лаборатории антибиотиков и микологии Всесоюзного ордена Ленина института экспериментальной ветеринарии, н 1971 —1974 гг. Производственные опыты проведены на базе 5 крупных птицеводческих хозяйств и птицефермах двух колхозов Ставропольского, Краснодарского краев н Кабардино-Балкарской АССР. В лабораторных опытах было использовано 690 цыплят, кур и индюшат. В производственных усло-4
илях исследования проведены па 165053 цыплятах, 400677 ни-дюшатах (первого возраста), 9600 петушках (3-месячного возраста) и 4800 курах.
Чувствительность возбудителя пуллороза-тифа Э. риНо-гит-^аШпагит к антибиотикам определяли методом серийных разведений. Материалом для исследований служили 74 эпизоотических штамма в. риПоппп-даШпагит, выделенных из неблагополучных по пулдорозу-тифу хозяйств зоны Северного Кавказа н 6 музейных штаммов, полученных из Всесоюзного государственного научно-контрольного института ветеринарных препаратов.
Определение количественного содержания хлортетрацик-лина в крови, органах и тканях индюшат после введения им днбномпцпна проводили методом диффузии в агар в чашках Петри по методике Е. Н. Дружининой (1959) с использованием цилиндриков. При расчете содержания хлортетрацпклина в органах н тканях использовали таблицы В. С. Дмитриевой (1965), Для определения степени их достоверности полученные цифровые данные подвергали статистической обработке но И. Л. Ойшшу (1960) 11 Н. Л. Плохнискому (1969). Результаты опытов по острой токсичности новой лекарственной формы дибномншша-дибиоветнпа для индюшат обрабатывали методом прямолинейной регрессии н статистически разностным методом Стьюдеита. Опыты по выяснению терапевтической и профилактической эффективности днбномицина и дн-тстрацнклпна при экспериментальном пуллорозе-тнфе проводили на индюшатах и цыплятах с суточного возраста в течение 30—40 дней с использованием общепринятых методик клинического исследования. Павшая и убитая птица подвергалась бактериологическому исследованию. С целью выяснения бактерионосительства выздоровевшая н пеза болевшая птица исследовалась серологически кровекапельной реакцией агглютинации.
Опыты по выяснению лечебно-профилактических свойств днбпомнцина при экспериментальном спнрохетозе поставлены на петушках 2-месячного возраста и курах. После заражения птиц вирулентной кровью от больных еппрохетозом кур н гусей в течение 10 дней проводили исследование «рови на наличие спирохет ц измерение температуры птиц. Мазкп крови фиксировали метиловым спиртом и окрашивали краской Гнм-за по Романовскому нли фуксином Цнля, исследовано более 600 мазков Учет эффективности антибиотиков проводили пу-
тем сравнения заболеваемости и падежа птицы в опытных и контрольных группах с учетом результатов бактериологического, серологического исследования и данных микроскопии.
При проведении исследований в производственных условиях диагноз па иуллороз-тнф и спнрохетоз устанавливали на основании клипико-эпизоотологических, латологоа'Натомических данных и результатов лабораторных исследований:
Изучение антибактериальной активности тетрациклиновых антибиотиков к 3. риНошт^аШпашт
Выделенные местные штаммы возбудителя пуллороза-тифа по культур ал ьно-морфологическим, биологическим, биохимическим и серологическим свойствам были типичными.
Результаты проведенных исследований показали, что взятые в опыт штаммы Э. риНогит^аШпагшп в одинаковой степени высокочувствительны к хлортетрацнклину, окснтстрацнклипу и тетрациклину. Уровень чувствительности исследованных штаммов к хлортетрацнклину определен в диапазоне 0,06— 6,2 ед/мл, однако для 30 ироц. штаммов бактерностатнческая концентрация антибиотика была в пределах 0,06—0,78 ед/мл. Антибактериальная активность окентетрациклина и тетрациклина составила 0,06—6,5 ед/мл. Рост 46 ироц. штаммов подавлялся минимальной концентрацией 0,06—0,78 ед/мл. Резистентных штаммов возбудителя пуллороза-тифа к тетрациклн-новым антибиотикам не выделено.
В наших опытах эпизоотические штаммы салмонелл, выде- ■ ленные от. разных видов птиц н в различных хозяйствах за последние 3 года, н штаммы, хранившиеся в музее в течение 10—30 лет, были одинаково чувствительными к тетрациклнно-вьгм антибиотикам. Полученные нами данные совпадают с результатами М. И. Войтова (1970), И. П. Завьялова (1964), В. И. Зюбаи (1061), А. В. Пересадина (1964), А. X. Саркнсо-иа с сотрудниками (1966), Е. Т. Тришкиной (1974), М. Мннева (1970) и др., в опытах которых чувствительность возбудителя пуллороза-тифа к тетрациклнновым антибиотикам составляла от 0,3 до 7,5 ед/мл. Однако наши результаты отличаюстя от данных Э. П. Гадуа,(1965), М. В. Капит.анакн ц Е. А. Федор-ченко (1963) и др., которые сообщили о выделении значительного числа резистентных штаммов, в
Концентрация хлортетрацнклнна в крови и распределение его в органах индюшат после однократного введения дибиомнцина
Важным условием рационального применения антибиотиков является создание бактериостатической концентрации препаратов в организме животных и птиц в течение всего курса лечения. Поэтому изучение концентрации препаратов в организме имеет существенное значение для разработки наиболее рациональных доз, кратности введения и научно обоснованных схем их прпменеиня при заболеваниях животных и птиц. Для этой цели антибиотик необходимо вводить в оптимальных дозах через определенное время.
Исследования по этому вопросу выполнены на 92 индюшатах 10- н 60-дневного возраста. Количество хлортетрацнклнна определяли в крови, сердце, легких, печени, почках, селезенке, мышцах, костной ткани, тонком и толстом отделе кишечника и содержимом жишечника методом диффузии в агар. Средние данные по концентрации антибиотика вычисляли из 3—4 определений.
л) Концентрация хлортетрацнклнна в сыворотке кровн индюшат после подкожного введения дибиомнцина
С целью отработки оптимальной дозы дибиомнцина препарат вводили индюшатам и дозах 25, 50, 100 н 200 тыс. ед/кг ticca. Исследованиями установлено, что при однократной инъекции дибиомнинна: в дозе 25 тыс. ед/кг хлортетрациклин в крови обнаруживался через I час в концентрации 0,15±0,013 ед/мл, через 3 часа — 0,09±0,005 ед/мл и антибиотик в пределах 0,05—0?3 ед/мл сохранялся до 3 суток; при введении 50 тыс. ед/кг хлортетрациклин содержался через 1 час в количестве 0,27±0,012 ед/мл, через 3 часа — 0,23±0,065 ед/мл, через 6 час — 0,25±0,029 ед/мл н на уровне 0,15—0,03 ед/мл находился до 4 суток; в дозе 100 тыс. ед/кг антибиотик регистрировался в кровн первые суткн в концентрации 0,96±0,077— 0,26^0,026 ед/мл, в последующие 9 дней на уровне 0,15—0,03 ' ед/мл; в дозе 200 тыс. ед/кг количество его составляло в первые суткн 0,53±0.082 —0,12*0,01 ед/мл, а в последующие 9 дней — 0,17—0,03 ед/мл. При однократном введении контрольного препарата биомицина в дозе 100 тыс. ед/кг веса хлортетрациклин в крови индюшат обнаруживался в первые
сутки в концентрации 0,60±0,01—0,06±0,005 ед/мл, В последующие 24 часа регистрировали в крови только следы антибиотика.
Анализ результатов исследования свидетельствует, что после введения дибиомицпна хлортетрациклии регистрировался в крови: при дозе 25 тыс. ед/кг в течение 3-х суток, при дозе 50 тыс. ед/кг — 4 суток, а при дозах 100 и 200 тыс. ед/кг в течение 10 дней.
Проведенные опыты позволили прийти к выводу, что из четырех испытанных доз дибиомицина наиболее оптимальной по уровню концентрации препарата в крови и длительности циркуляции в организме индюшат оказалась доза 100 тыс, ел'кг веса, которая была использована нами при изучении распределения антибиотика в органах и тканях индюшат.
б) Концентрация и распределение хлортетрациклнна в организме индюшат после введения дибиомицина
С целью изучения распределения хлортетрациклнна в организме индюшат днбиомицин вводили однократно подкожно в дозе 100 тыс. ед/кг веса. Индюшат убивали через 1, 3, 6 н 24 часа, а затем через 2, 3, 4, 6, 8, 10, 12 и 15 суток после введения препарата. Исследованию были подвергнуты сыворотка крови, мышца сердца, легкие, печень, почки, мышцы, кость и костный мозг, тканн тонкого и толстого отдела кишечника и содержимое кишечника.
После введения дибиомицина хлортетрацнклин улавливался в различных концентрациях во всех исследованных органах и тканях в течение 8—10 суток, (см. таблицу I). В высоких
Распределение хлортетрациклнна к организме индюшат 10-дневного возраста после однократного подкожного введения днбиомицнна в дозе 100 тыс, ед/кг