ОПРЕДЕЛЕНИЕ КАЛЬЦИЯ, МАГНИЯ И ФОСФОРА В КОРМАХ
В связи с этим наибольшее распространение получили химические методы анализа.
Определение кальция и магния трилонометрическим методом.
Суть метода заключается в способности трилона Б в щелочной среде (pH 13) образовывать устойчивый комплекс с катионом кальция, а при pH 12 — с кальцием и магнием. На этом основании применяют титриметрический способ анализа.
Комплексные соединения кальция и магния с трилоном Б бесцветные, поэтому эквивалентную точку титрования определяют по изменению окраски индикаторов, в качестве которых используют мурексид и хромоген черный. Мурексид при наличии кальция окрашивает раствор в красный цвет, а при взаимодействии его с трилоном Б — в фиолетовый. Хромоген черный окрашивает растворы, содержащие кальций и магний, в вишнево-красный цвет, а при связывании с трилоном Б — в сине-голубой.
Определение кальция. В колбу на 250 мл наливают 10 мл раствора золы и добавляют 50 мл дистиллированной воды. После этого приливают по 1 мл 10%-ного раствора цитрата натрия и 20%-ного раствора гидроксида натрия. На кончике ножа добавляют индикатор мурексид. Для приготовления холостой пробы применяют те же реактивы, но вместо зольного раствора используют дистиллированную воду. Анализ проводят в двух повторностях.
где V— объем трилона Б, пошедший на титрование испытуемой пробы, мл; V\ — объем трилона Б, пошедший на титрование холостой пробы, мл; к — поправка к титру трилона Б; 0,02 — масса кальция, связываемая 1 мл трилона Б, г; V2 — объем раствора золы, мл; т — навеска корма, г; V2 — объем раствора золы, взятого на анализ, мл; 100 — коэффициент для перевода в проценты.
Определение суммы кальция и магния. Определение проводят в двух повторностях. В колбу на 250 мл помещают 10 мл раствора золы, добавляют 50 мл дистиллированной воды, 10 мл хлорно-аммиачного буфера, 1 мл 1%-го раствора хлорида гидроксиламина и на кончике ножа хромоген черный. Окраска растворов должна быть вишнево-красной. Титрование проводят трилоном Б до появления сине-голубой окраски.
По разности между объемом трилона Б, затраченного на реакцию с кальцием и магнием, и его расходом на титрование кальция устанавливают количество трилона Б, связавшегося с магнием.
Содержание магния (XMg), %,
где К—объем трилона Б, пошедший на титрование суммы кальция и магния, мл; V] — объем трилона Б, пошедший на титрование кальция, мл; к — поправка к титру трилона Б; 0,012 —масса магния, связываемая 1мл трилона Б, г; К2 — объем раствора золы, мл; т — навеска корма, г; V3 — объем раствора золы, взятый на анализ, мл; 100 — коэффициент для перевода в проценты.
Определение фосфора. Метод основан на способности фосфатов в нитратной среде образовывать с метаванадатом и парамолибдатом тетрагидратом аммония желтое водорастворимое соединение (фосфорно-ванадомолибдатный комплекс).
Для приготовления стандартного раствора фосфора навеску од- нозамещенного калия массой 4,393 г переносят в мерную колбу на 1л, растворяют и доводят до метки дистиллированной водой. В 1 мл полученного раствора содержится 1 мг фосфора.
Для приготовления рабочего раствора фосфора в мерную колбу на 100 мл вносят 10 мл стандартного раствора фосфора и доводят дистиллированной водой до метки. В 1 мл такого раствора содержится 0,1 мг фосфора.
Чтобы провести анализ, необходимо построить калибровочную кривую (график). Для этого берут 7 колб на 100 мл, в которые заливают реактивы в нижеприведенной последовательности (табл.
3. Приготовление растворов для определения фосфора в кормах
После внесения в колбы рабочего раствора, воды и азотной кислоты раствор доводят до кипения (для удаления паров азота), ополаскивают внутренние стенки колбы водой, вносят реагирующую смесь и доводят объем раствора до метки водой.
Растворы колориметрируют на ФЭКе с синим светофильтром при длине волны 450 нм. В кювету для сравнения наливают нулевой раствор (из первой колбы).
При построении графика на оси ординат откладывают показания ФЭКа, а на оси абсцисс — содержание фосфора (мг) в 100 мл эталонных растворов.
После этого в колбу на 100 мл вносят 3—5 мл раствора золы (лучше после мокрого озоления), добавляют 5 мл разбавленной азотной кислоты и доводят смесь до кипения. Затем внутренние
стенки колбы обмывают водой и добавляют 15 мл реагирующей смеси, охлаждают и доводят дистиллированной водой до метки. Через 30—40 мин растворы колориметрируют. По графику определяют количество фосфора в анализируемой пробе.
где а — масса фосфора, определенная по графику, мг; И—общий объем раствора золы, мл; 100 — коэффициент для перевода в проценты; т — навеска корма, г; V] — объем раствора золы, взятый для анализа, мл; 1000 — пересчет навески в миллиграммы.
Цель работы. Освоить методы определения кальция, магния и фосфора в кормах.
Необходимые материалы и оборудование. Для определения кальция — 0,01 н. раствор трилона Б с установленным титром, 10%-ный раствор цитрата натрия, 20%-ный раствор гидроксида натрия, мурексид. Для определения суммы кальция и магния — 1%-ный раствор хлорида гидроксиламина, хромоген черный, хлорноаммиачный буфер, раствор трилона Б. Дистиллированная вода, колбы на 250 мл, мерные цилиндры, бюретки.
Задание 1. Определите содержание кальция и магния в растворе золы трилоно- метрическим методом. Результаты запишите в журнал по форме
Необходимые материалы и оборудование. Дистиллированная вода; 0,25%-ный раствор ванадата аммония (2,5 г метаванадата аммония растворяют в кипящей воде, охлаждают, добавляют 20 мл азотной кислоты плотностью 1,41 г/см3, переносят в колбы на 1 л и доводят дистиллированной водой до метки); 5%-ный раствор молибдата аммония (50 г парамолибдата тетрагидрата аммония растворяют дистиллированной водой температурой 60 °С в мерной колбе на 1 л, охлаждают и доводят водой до метки); разбавленная азотная кислота (к 2 частям дистиллированной воды приливают 1 часть концентрированной кислоты); реагирующая смесь (0,25%-ный раствор ванадата аммония, 5%-ный раствор парамолибдата тетрагидрата аммония и разбавленную азотную кислоту смешивают в одинаковых объемах); мерные колбы на 100 мл, цилиндры, ФЭК.